C hepatīta PCR analīze: kur un kā to pareizi nodot, kas nozīmē pozitīvu un negatīvu rezultātu

C hepatīta PCR ir obligāta analīze, pārbaudot pacientu ar aknu bojājuma simptomiem. Pētījums tiek noteikts, lai apstiprinātu diagnozi un iegūtu vispilnīgāko informāciju par slimības izraisītāju, vīrusu infekcijas aktivitāti. Rezultāti kalpo par pamatu pretvīrusu terapijas izrakstīšanai, tās ilguma noteikšanai un efektivitātes novērtēšanai..

Salīdzinoši nesen plaši izplatīta diagnostika, izmantojot polimerāzes ķēdes reakcijas tehniku. Pētījumi par šo tēmu tiek veikti kopš 70. gadu vidus. Bet pirmās publikācijas par PCR izmantošanas iespēju praktiskajā medicīnā parādījās tikai 80. gadu vidū..

  • PCR veidi
  • Indikācijas testam
  • Kur ņemt?
  • Asins ziedošanas noteikumi
  • Rezultātu dekodēšana
  • PCR diagnostikas plusi
  • Cena

Skaidrojot, kas ir PCR, ārsti uzsver, ka tā ir visuzticamākā un uzticamākā C hepatīta analīze. Šis tests ļauj ne tikai identificēt vīrusa RNS daļiņas, bet arī noteikt tā koncentrāciju (norāda infekcijas procesa aktivitāti) un genotipu. Iegūtajiem rezultātiem ir galvenā loma turpmākās terapijas taktikas un shēmas noteikšanā..

Kāda ir reakcijas inscenēšanas būtība? Ar noteiktu bioloģiski aktīvu vielu palīdzību tiek panākts vīrusa RNS daļiņu skaita pieaugums nelielā asins tilpumā. Pēc tam ar dažādām fizikāli ķīmiskajām metodēm nosaka genoma daļas.

PCR tiek veikts, izmantojot vairākus komponentus:

  • Primer. Tas ir mākslīgi sintezēts savienojums, kurā nukleotīdu secība ir pilnīgi identiska vīrusa RNS noteiktajam reģionam, kurā netiek veiktas mutācijas un izmaiņas atkarībā no genotipa. C hepatīta vīrusa RNS noteikšana tiek veikta, izmantojot stingri specifisku grunti.
  • RNS polimerāze. Ferments, kam raksturīga stabilitāte un strukturāla noturība pret temperatūras izmaiņām, kas nepieciešamas pareizai ķīmiskās reakcijas norisei. Nodrošina RNS ķēdes uzbūvi vienā no PCR posmiem.
  • Olbaltumvielu maisījums. Lai izveidotu papildu RNS sekcijas, ir nepieciešams "celtniecības materiāls", kura bioloģiskajam paraugam pievieno dažus proteīna struktūras savienojumus.
  • Buferis. Maisījums, kas uztur optimālo pH līmeni polimerāzes ķēdes reakcijai.
  • Bioloģiskā materiāla paraugs, par kuru ir aizdomas, ka tas satur HCV (C hepatīta vīrusa) RNS paraugu.

Dažās PCR inscenēšanas metodēs papildus tiek izmantotas RNS zondes un citas iekšējās kontroles, kuras tiek izmantotas kā kontroles paraugi, identificējot rezultātus.

Pats vīrusu RNS reģionu palielināšanas process, izmantojot matricu, tiek saukts par amplifikāciju. Reakcija norit vairākos posmos:

  1. Denaturējošs. RNS virkņu "atritināšanas" process tiek nodrošināts, paaugstinot temperatūru līdz noteiktam līmenim.
  2. Atlaidināšana. Pēc temperatūras samazināšanas līdz vajadzīgajām vērtībām primeri pievienojas RNS. Šis posms ir iespējams tikai tad, ja asins paraugā ir vēlamās vīrusu daļiņas..
  3. Tieša vīrusu RNS reģionu sintēze, piedaloties fermentiem.

Uzskaitītie PCR insultu cikli tiek atkārtoti vairākus desmitus reižu, kas nodrošina vairākkārtēju C hepatīta izraisītāja RNS reģionu skaita palielināšanos par līmeni, kas noteikts ar laboratorijas metodēm.

Asins paraugs pirms testa tiek atbilstoši sagatavots. Iekļautā RNS tiek adsorbēta uz nesēja bufera, pēc tam nomazgāta un izmantota polimerāzes ķēdes reakcijas sākšanai.

Rezultātus nosaka vai nu ar elektroforēzi (horizontāli vai vertikāli), vai ar hibridizāciju. Metode reakcijas rezultātu dekodēšanai tiek izvēlēta, pamatojoties uz pētījuma mērķiem (vienkārši identificējot RNS vai nosakot tā aptuveno daudzumu).

PCR - visprecīzākais C hepatīta asins tests

Ierosināto HCV pētījumu saraksts ietver vairākus priekšmetus, kas atšķiras pēc izmaksām, gatavības laika un ieviešanas metodes..

Ja mēs atsaucamies uz Pasaules Veselības organizācijas (PVO) protokoliem, infekcijas diagnosticēšanas procedūra ietver vairākus secīgus posmus..

Vispirms viņi īrē:

  • vispārēja asiņu un urīna analīze;
  • asins bioķīmija;
  • glikozes satura izpēte (stingri tukšā dūšā);
  • HIV tests;
  • fluorogrāfija;
  • imunogramma (ja jums ir aizdomas par autoimūno patoloģiju klātbūtni).

Ja bioķīmiskās asins analīzes parametri atšķiras no fizioloģiskās normas, pacientam tiek noteikts tests, kura pamatā ir specifisku antivielu noteikšana, ko rada vīrusa saskare ar asinīm (ELISA).

Bet šādam C hepatīta asins testam ir ievērojams trūkums. Antivielu sintēzes process ir atkarīgs no imūnkompetentu šūnu darbības un ražošanas. Ķermeņa individuālās īpašības var izraisīt gan viltus negatīvas, gan viltus pozitīvas atbildes..

Pirms ELISA testa izrakstīšanas ārsts stāsta pacientam par iespējamo kļūdu, kas rada atbildes jautājumu: "Kāda asins analīze parāda C hepatītu ar minimālu risku iegūt nepareizus rezultātus?" Lai apstiprinātu vai atspēkotu diagnozi, visprecīzākais laboratorijas tests ir reālā laika PĶR.

Turpmākā rīcības taktika ir atkarīga no tā, ko parāda pētījums. Ja diagnoze tiek apstiprināta, pacientam nekavējoties izraksta hepatoprotektorus, brīdina par pareizas uztura un veselīga dzīvesveida nozīmi. Bet mērķtiecīga terapija nav iespējama, nenosakot vīrusu slodzes līmeni un C hepatīta genotipu..

Dažas zāles var izraisīt B hepatīta saasināšanos. Tāpēc, lai izslēgtu komplikācijas, papildus tiek noteikti HBsAg testi. HCV ārstē tikai pēc negatīva testa rezultāta.

Sugas: kvalitatīvā, kvantitatīvā un genotipizēšana

Sākotnējā C hepatīta diagnozē ražoto antivielu titru nosaka ar seroloģisko metodi. Šis rezultāts aptuveni parāda patoloģiskā procesa aktivitāti. Bet ārsts var iegūt visprecīzāko informāciju tikai pēc PCR datu izpētes.

Pašlaik gandrīz visās laboratorijās analīze tiek veikta, izmantojot ultraskaņas metodi. Tādējādi HCV diagnoze ir iespējama 10-14 dienu laikā pēc inficēšanās, retāk - pēc 2,5-3 nedēļām. Atkarībā no mērķiem, kas tiek sasniegti pētījuma laikā, ārsts izraksta noteiktu testa veidu.

Ir šādi PCR veidi:

  1. Kvalitatīva. Izrakstot diagnostikas testus, pacientiem rodas jautājums, ko parāda šī pētījumu metode. Kvalitatīvā analīze ar PCR metodi ir ļoti jutīgs tests, kas nosaka vīrusa RNS klātbūtni asinīs minimālā koncentrācijā. Parasti šāda veida polimerāzes ķēdes reakcija tiek veikta, izmantojot apgrieztās transkripcijas tehnoloģiju. Šī ir viena no nedaudzajām PCR metodēm, kurā RNS var izmantot kā mērķi.
  2. Kvantitatīvs. C hepatīta kvantitatīvā noteikšana ļauj noteikt precīzu HCV RNS līmeni asinīs. Pētījumi ir iespējami tikai vienā veidā - reālā laika metodē. Gatavojot materiālu PĶR, paraugam pievieno krāsu. Pēc katra amplifikācijas cikla tiek veikts automatizēts reāllaika kvantitatīvais pētījums. Tehniku ​​bieži veic kombinācijā ar reverso transkripciju. Tādējādi ir iespējams kvalitatīvi noteikt nelielu vīrusa RNS kopiju skaitu. Ir lietderīgi kvantitatīvi noteikt HCV RNS līmeni, ja tiek iegūts pozitīvs kvalitatīvās PCR rezultāts..
  3. Genotipēšana. Analīze tiek veikta diagnostikas procesa pēdējā posmā. Pētījuma princips ir balstīts uz nukleotīdu secības atšķirību, kas atšķir vienu hepatīta C vīrusa genotipu no cita. Parasti analīzi veic ar multi-primer (multiplex) PCR.

Ja jums ir aizdomas par vīrusa nesēju, ir nepieciešams veikt augstas kvalitātes PCR. Ja rezultāts ir negatīvs, cilvēks, visticamāk, ir vesels. Bet, lai pilnībā izslēgtu infekciju, ieteicams pētījumu atkārtot pēc 7-10 dienām. Ja tiek atklāta vīrusa RNS, tiek veikti papildu testi (kvantitatīvie un genotipizējošie).

Norādes laboratorijas testam

Galvenā norāde par asins ziedošanu C hepatīta gadījumā ar polimerāzes ķēdes reakcijas metodi ir pozitīva enzīma imūnanalīze (neatkarīgi no veida: Kopējais, diferencētais IgG un IgM tests).

Turklāt jums jāpārbauda:

  • grūtniecības laikā (tests tiek veikts divas reizes - pirmajā trimestrī un 7-10 nedēļas pirms dzimšanas);
  • strādājot ar paaugstinātu infekcijas risku (medmāsas, laboratorijas palīgi, donoru centru darbinieki, kosmetologi utt.);
  • ar izveicīgu dzimumaktu un neaizsargātu kontaktu ar nepazīstamu cilvēku;
  • uz HIV, vēža, noteiktu zāļu lietošanu utt. fona;
  • pacienti, kas atkarīgi no intravenozām zālēm;
  • ar pastāvīgu invazīvu diagnostikas vai terapeitisko procedūru veikšanu;
  • ar asins pārliešanu, kas veikta pirms 1992. gada (iepriekš nebija ticamu veidu, kā pārbaudīt donora bioloģisko materiālu attiecībā uz vīrusa klātbūtni).
  • kad atvērta brūce nonāk saskarē ar kāda cita asinīm, nesterilizētiem medicīnas instrumentiem.

Saslimstība ar katru gadu pieaug. Tāpēc, lai savlaicīgi atklātu infekciju, HCV laboratoriskos testus ieteicams veikt reizi gadā..

Kur pārbaudīt

Sazinoties ar klīniku, pacientam ir tiesības uz bezmaksas pārbaudēm. Bet vispirms viņi veic ELISA testu. Un tikai ar pozitīvu vai apšaubāmu rezultātu tiek parādīts PĶR pētījums. Tāpēc steidzamu diagnozi var noteikt, sazinoties ar apmaksātu laboratoriju, kur pacientam ērtā laikā varat ziedot asinis PĶR. Tajā pašā laikā ieteicams nekavējoties pārbaudīt aknu enzīmu rādītājus, standarta klīniskos asins parametrus.

Parasti asins izpēte ar PĶR ir pieejama gandrīz jebkurā laboratorijā. Ja asins savākšanas punkts nav aprīkots ar atbilstošu aprīkojumu, bioloģiskais materiāls tiek transportēts pētījumiem atbilstoši temperatūras režīmam un citiem apstākļiem. PCR klīnikā ir iespējams tikai pēc citiem izmeklējumiem, kuru rezultāti netieši norāda uz C hepatīta klātbūtni.

Kā pareizi ziedot asinis

Pirms ziedot asinis iespējamā vīrusa noteikšanai, jums jāievēro vairāki noteikumi, lai sagatavotos analīzei..

Galvenie aspekti ir norādīti piezīmē:

  1. 5-7 dienas atsakieties no taukainas, ceptas pārtikas, alkohola lietošanas. Parasti ārsti iesaka ievērot 5. diētas uztura noteikumus.
  2. Neēdiet 12-14 stundas pirms pētījuma. Jūs varat dzert tikai ūdeni.
  3. Labāk ir ziedot asinis no rīta..
  4. Pirms procedūras nesmēķējiet.

Jums vajadzētu arī brīdināt ārstu par lietotajiem medikamentiem, iespējamām veselības problēmām, hroniskām slimībām..

Asinis tiek ņemtas no vēnas. Pēc procedūras beigām medmāsa aizdara punkcijas vietu ar sterilu apmetumu, brīdina par nepieciešamību saliekt roku un turēt to šajā stāvoklī 10-15 minūtes. Pretējā gadījumā sāpīgas hematomas iespējamība ir augsta..

Cik ilgs laiks vajadzīgs pētījumam?

Cik daudz analīzes tiek veiktas, ir atkarīgs no laboratorijas. Vidējais izpildes laiks svārstās no 1-3 dienām. Dažas klīnikas nodrošina apmaksātu pakalpojumu ātrai PĶR pārbaudei, tomēr laiku ierobežo medicīniskā aprīkojuma iespējas..

Klīnikā rezultātus var nodot ārstam 7-10 dienu laikā. Tas ir saistīts ar lielu pacientu pieplūdumu. Tajā pašā laikā bioloģiskais materiāls tiek uzglabāts atbilstoši visām prasībām.

Rezultātu dekodēšana

Parasti augstas kvalitātes PCR dekodēšana nav grūta. Bet, lai izvairītos no nepareizas interpretācijas, izmantojot laboratorijas saņemto veidlapu, jums jākonsultējas ar ārstu. Opcijas, kas nozīmē šo vai citu PCR veidu, ir parādītas tabulā.

Negatīvs: persona ir vesela vai vīrusa RNS koncentrācija asinīs ir pārāk zema, lai to varētu noteikt.

Pozitīvi: persona ir inficēta

Veic, ja vīrusa RNS tiek atklāta ar kvalitatīvu pētījumu metodi.

Atkarībā no iegūtajiem testa rezultātiem nosaka vīrusa slodzes līmeni

Veic C hepatīta gadījumā, ko apstiprina citas pētījumu metodes.

Analīze ļauj noteikt precīzu patoloģijas patogēna genotipu

Bet bieži rodas situācija, kad C hepatīta ELISA ir pozitīva, bet PCR ir negatīva. Šādus testa rezultātus var atšifrēt tikai ārsts..

Tomēr šādi dati ir iespējami šādos gadījumos:

  • grūtniecība;
  • pārnests akūtā formā C hepatīts;
  • HCV ārstēšana pabeigta;
  • infekciju klātbūtne, kas palielina kļūdaini pozitīvu ELISA rezultātu iespējamību.

Tikai polimerāzes ķēdes reakcija parāda precīzu vīrusu infekcijas klātbūtni organismā. Uz negatīvās PCR fona pozitīva ELISA vairumā gadījumu norāda, ka persona nav inficēta. Bet ārstam vajadzētu precīzi noteikt viltus pozitīvā rezultāta cēloni..

Kvalitatīvā analīze

Kvalitatīva C hepatīta CP analīze apstiprina patogēna klātbūtni asinīs. Ja vīrusa RNS netiek atklāts, cilvēks ir vesels. Bet, ja ir aizdomas par infekciju, ieteicams atkārtoti veikt pētījumu. Pozitīvs rezultāts norāda uz infekciju. Bet šī analīze neļauj atšķirt hronisku C hepatītu no akūta un nevar parādīt, cik aktīvs ir patoloģiskais process..

Kvantitatīvais tests

Kvantitatīvā analīze ar PCR tiek veikta pēc diagnozes apstiprināšanas, un tās dekodēšana ir svarīga ārstēšanas taktikas noteikšanai. Atkarībā no C hepatīta izraisītāja daļiņu koncentrācijas izšķir vairākas vīrusu slodzes pakāpes: vidēja, augsta un zema. Jo augstāks rādītājs, jo smagāka ir infekcija un grūtāka ir terapija. Parasti vīrusa RNS asinīs nav.

Genotipēšana

Daudzas laboratorijas veic genotipēšanu kopā ar kvantitatīvo PCR, kas ļauj ietaupīt naudu. Šāds pētījums tiek veikts tikai vienu reizi, pirms ārstēšanas uzsākšanas. Parasti tiek veikta viena no četriem visbiežāk sastopamajiem genotipiem (1, 2, 3 vai 4). Tajā pašā laikā tiek noteikts HCV apakštips. Genotipēšana C hepatīta 5. un 6. pasugai nav iespējama katrā laboratorijā.

PCR diagnostikas plusi

Diagnostika ar PCR metodi ir plaši izplatīta, pateicoties:

  • augsta precizitāte (ar nosacījumu, ka tiek izmantotas jaunākās paaudzes testa sistēmas);
  • biomateriāla paraugu ņemšanas vieglums;
  • ātri rezultāti (ne vairāk kā 5 dienas).

Bet galvenā priekšrocība ir pētījuma plašās diagnostikas iespējas. Analīze ļauj ne tikai identificēt vīrusu, bet arī precīzi noteikt tā koncentrāciju organismā un noteikt infekcijas genotipu. Turklāt, lai novērtētu pretvīrusu terapijas efektivitāti, jāveic kvantitatīvi pētījumi. Galvenais ārstēšanas mērķis ir sasniegt testa normu (t.i., nenosakāmu HCV RNS līmeni) pretvīrusu kursa 4, 12 vai 24 nedēļās un saglabāt šo rezultātu.

Cena

PĶR analīzes izmaksas atšķiras atkarībā no reģiona. Tātad, Maskavā cenas ir augstākas. Augstas kvalitātes PCR maksās 600-800 rubļu, kvantitatīvs - 2200-3000 rubļu, genotipēšana - no 1000 rubļiem. Precīzi, cik maksā konkrētais pētījums, varat uzzināt tieši laboratorijā, medicīnas organizācijas vietnē vai pa tālruni.

Ko tas nozīmē, ja asinīs tiek konstatētas antivielas pret C hepatītu un PCR ir negatīva?

Cilvēka aknās katru dienu ir milzīgs stress. Orgāns nepārtraukti filtrē asinis, attīrot tās no toksiskiem savienojumiem. Tādēļ pastāvīgi jāuzrauga aknu stāvoklis. To palīdzēs veikt diagnostikas procedūras..

Lai identificētu tādas bīstamas slimības kā C hepatīts attīstību, polimerāzes ķēdes reakcija ļauj. Tomēr daudzi pacienti saskaras ar situāciju, kad ir C hepatīta antivielas, un PCR ir negatīva. Apsveriet, ko tas nozīmē.

Par ko es uzzināšu? Raksta saturs.

C hepatīta vīrusa pārnešanas ceļi

C hepatīts ir bīstama vīrusu rakstura aknu slimība. Vīrusi no slima cilvēka veselīgam cilvēkam tiek nodoti ar bioloģisko šķidrumu palīdzību: asinis, siekalas, sperma, izdalījumi no maksts.

C hepatīta infekcijas metodes

Medicīnas speciālisti identificē apstākļus, kas atvieglo vīrusu slimības pārnešanu:

  1. Asins pārliešana.
    Deviņdesmitajos gados ziedotās asinis netika pakļautas laboratorijas testiem, tāpēc saņēmēju infekcijas gadījumi bija sastopami diezgan bieži. Donorus tagad pārbauda pret hepatītu.
  2. Atkārtota injekcijas adatas lietošana.
    Riska grupu veido narkomāni un cilvēki ar zemiem ienākumiem.
  3. Neaizsargāts dzimumakts.
    Iemesli, kas noved pie inficēšanās ar vīrusu: neizteiksmīgas attiecības, bieža partneru maiņa, izlaidība. Uzticami aizsargā pret C hepatītu, izmantojot prezervatīvu.
  4. Dzimšanas kanālu šķērso bērns.
    Grūtniecības laikā augli aizsargā placenta. Nav aizsardzības dzemdību laikā.
  5. Zīdīšanas periods.
    Inficētas sievietes pienā nav vīrusu daļiņu. Bīstami ir tas, ka zīdaiņi barošanas laikā iekož caur sprauslām. Šādos apstākļos inficētās asinis iekļūs trauslajā organismā..
  6. Slikta instrumentu sterilizācija.
    Kosmētiskām procedūrām, piemēram, manikīram, pedikīram, tetovējumiem, pīrsingiem.

Arī veselības aprūpes darbiniekiem, kuri pastāvīgi kontaktējas ar ķirurģiskiem instrumentiem un lietotām šļircēm, ir risks inficēties ar vīrusu. Tādēļ riska grupas medicīnas personālam periodiski tiek diagnosticēts C hepatīts.

Pretēji izplatītajam uzskatam, varbūtība saslimt ar C hepatīta vīrusu mājsaimniecībā ir gandrīz neiespējama..

Kad parādās antivielas pret C hepatītu?

Vīrusa iekļūšana cilvēka ķermenī izraisa īpašu antivielu sintēzi, kas pretojas infekcijas izplatībai. Antivielu ražošana tiek novērota divos gadījumos:

  • vakcinācija pret hepatītu;
  • vīrusa izplatīšanās slimības rezultātā.

Antivielu klātbūtni asins serumā var noteikt, izmantojot diagnostikas procedūras, tikai pēc divām līdz trim nedēļām. Slimību noteikšana bieži notiek novēloti. Līdzīgu problēmu izskaidro asimptomātiska patoloģijas gaita. Pacients sajūt nogurumu, garastāvokļa pasliktināšanos, galvassāpes. Tomēr šādām sāpīgām pazīmēm reti pievērš uzmanību..

Ir antivielas pret C hepatītu, bet PCR ir negatīva: cēloņi

Ar enzīmu imūnanalīzi var noteikt ne pašu vīrusu, bet tikai antivielu klātbūtni pret to. Cilvēka imūnsistēma ir veidota tā, ka pēc atveseļošanās tā ķermeņa iekšpusē atstāj aizsargājošās rezerves, kas neļaus recidīvu. Tāpēc pēc imunitātes kontakta ar C hepatīta vīrusu paliek noteikts daudzums antivielu.

Ja C hepatīta PCR ir negatīvs un ir antivielas, tas nozīmē, ka pacientam agrāk ir bijusi slimība. Retos gadījumos šāds rezultāts norāda uz patoloģijas pāreju uz nebīstamu latentu formu vai hronisku stadiju. Šādos gadījumos, ja pacients ievēro imunologa ieteikumus, vīrusu daļiņu aktivizēšanas bīstamība tiek samazināta līdz nullei..

Veicot diagnozi, veselības aprūpes darbinieki galvenokārt vadās pēc PĶR rezultātiem. ELISA tiek izmantota tikai kā primārā diagnoze.

Diagnozējot C hepatītu, vispirms tiek veikta ELISA, apstiprināšanai - PCR

Kas ir PCR?

PCR analīze pelnīti tiek uzskatīta par visefektīvāko metodi C hepatīta noteikšanai. Polimerāzes ķēdes reakcija ir spējīga noteikt vīrusa genotipa klātbūtni asins plazmā slimības attīstības sākumposmā pēc septiņām līdz desmit dienām. Diagnozei tiek izmantoti divu veidu PĶR:

  1. Kvalitatīva.
    Tas tiek noteikts pēc pozitīva antivielu klātbūtnes testa. Metodes būtība ir noteikt, vai pacienta asinīs ir C hepatīta vīruss. Daži apstākļi var dot kļūdaini negatīvu rezultātu, piemēram, laboratorijas testēšana pirmajās dienās pēc vīrusu daļiņu iekļūšanas organismā, veselības aprūpes darbinieku kļūdas, lietojot asinis, ārstēšana ar heparīna injekcijām.
  2. Kvantitatīvā PCR diagnostika.
    Laboratorijas pētījumi nosaka vīrusu daļiņu koncentrāciju organismā. Slimības smagums un stadija ir tieši proporcionāla vīrusa daudzumam. Terapeitiskā kursa īpašības un panākumi ir atkarīgi arī no kvantitatīvās PCR rezultāta. Ar zemu vīrusu daļiņu koncentrāciju pilnīgas atveseļošanās varbūtība sasniedz deviņdesmit deviņus procentus.Pārmērīgi rādītāji, gluži pretēji, samazina ārstēšanas panākumus līdz minimumam, kā arī var izraisīt pacienta labklājības pasliktināšanos. Atklājot slimību, kvantitatīvā PCR diagnostika tiek veikta atkārtoti - pēc viena, trīs un sešiem mēnešiem. Šādi pasākumi ir nepieciešami, lai izsekotu slimības dinamikai un objektīvi novērtētu ārstēšanas rezultātus..

Vai man ir atkārtoti jāveic testi?

Pozitīvs ELISA rezultāts parāda antivielu klātbūtni asins plazmā un norāda uz faktu, ka cilvēka imūnsistēma ir sadūrusies ar C hepatīta vīrusu. Tāpēc nepieciešama papildu diagnostika, izmantojot PCR. Pozitīvs rezultāts viennozīmīgi apstiprinās slimības attīstību..

Ja rezultāts ir negatīvs, deviņdesmit procenti gadījumu pacients ir vesels. Tomēr joprojām pastāv varbūtība, ka slimība ir tikai sākusies, un vīrusu daļiņu ir tik maz, ka PCR pētījumi vēl nespēj tās atklāt..

Tāpēc, lai pilnībā izslēgtu C hepatītu, medicīnas darbinieki pēc sešiem mēnešiem izraksta otru pārbaudi. Ja rezultāts ir negatīvs, pacients var būt pārliecināts, ka nav slimības.

Ko darīt, ja tiek atrastas antivielas un PCR ir negatīva?

Antivielu klātbūtne cilvēka iekšējā vidē var liecināt par C hepatīta vīrusa klātbūtni latentā formā pat ar negatīvu PCR. Tāpēc šādos gadījumos, lai pasargātu cilvēku no slimības procesa aktivizēšanas, imunologi izraksta ikgadēju laboratorijas testu..

Turklāt pacients saņem šādus ieteikumus:

  • samazināt taukainu, ceptu ēdienu lietošanu;
  • palielināt tīra ūdens dienas devu līdz diviem litriem;
  • izslēgt alkoholiskos dzērienus;
  • esiet uzmanīgs, rīkojoties ar instrumentiem kosmētisko un medicīnisko procedūru laikā.

Antivielu noteikšana asins plazmā nav iemesls izmisumam. Viņu klātbūtne vēl neliecina par C hepatīta gaitu. Lai iegūtu pareizu diagnozi, jums būs jāveic visaptveroša medicīniskā pārbaude.

Kas ir anti-HCV negatīvs?

Anti-HBs pozitīvs un negatīvs: ko tas nozīmē, atšifrējums

Pozitīvs vai negatīvs HBsAg asins analīzē

HBsAg un HCV asins analīze: kas tas ir, indikācijas, dekodēšana

Anti-HCV kopējie pozitīvie un negatīvie testi: ko tas nozīmē?

Kvalitatīva un kvantitatīva C hepatīta PCR analīze: negatīva, pozitīva, dekodēšana

C hepatīts ir slimība ar vīrusu etioloģiju, kas ietekmē aknas. Šo stāvokli provocē HCV vīruss ar RNS molekulu. Šīs skābes klātbūtne ļauj veikt C hepatīta PCR analīzi.

Attiecīgās slimības briesmas ir tādas, ka periods starp vīrusa iekļūšanu organismā un pirmo simptomu parādīšanos var būt diezgan ilgs - no 1-2 līdz 4-5 nedēļām. Tas apgrūtina slimību identificēšanu un savlaicīgu terapijas sākšanu..

Atkarībā no vīrusa nesēja organisma īpašībām, slimība var būt akūta, kā arī iegūt hronisku formu, kurai nepieciešama dārga un ilgstoša ārstēšana. Ja tiek atklātas C hepatīta vīrusu daļiņas, pacientam tiek noteikti nepieciešamie testi, no kuriem viens ir C hepatīta PCR. Šī analīze tiek veikta absolūti visām personām, kurām ir konstatētas vīrusa antivielas..

Asins analīze palīdzēs ārstam noteikt C hepatīta vīrusa klātbūtni vai neesamību pacienta ķermenī. Šis rādītājs nosaka vīrusa daudzumu, kas inficēja ķermeni, kā arī tā genotipu un īpašības..

Pamatojoties uz rezultātiem, kas iegūti pēc šīs analīzes veikšanas, kā arī atsaucoties uz papildu veiktajiem pētījumiem, speciālists nosaka ārstēšanas ilgumu un pacienta draudu pakāpi citu cilvēku veselībai..

Kas ir C hepatīta RNS analīze?

PCR C hepatītam ir cits nosaukums - RNS analīze. Šis nosaukums ir izskaidrojams ar to, ka RNS daļiņa atrodas vīrusā. Šis mikroorganisms spēj mutēt.

Visiem vīrusa genotipiem ir raksturīga atšķirīga rezistence, tāpēc katram pacientam tiek nozīmētas atšķirīgas terapijas metodes, un katrā atsevišķā gadījumā turpmākā prognoze var atšķirties..

Asinis no vēnas darbojas kā testa materiāls. IT jādara tukšā dūšā. Pārbaude parasti tiek veikta, izmantojot reālā laika PCR metodi, taču var izmantot arī COBAS AMPLICOR testu. Neatkarīgi no izvēlētā pētījuma veida ir ārkārtīgi svarīgi ņemt vērā jutības slieksni, tas ir, reaģenta spēju noteikt mazāko vīrusu daļiņu koncentrāciju asinīs.

Ja rādītāji ir normāli, tad testa atšifrējums norāda "nav atrasts".

C hepatīta analīzes veidi pēc PCR

  • kvantitatīvā analīze;
  • kvalitatīvs;
  • genotropija.

Pateicoties testam, jūs varat identificēt vīrusu infekcijas ģenētiku, kā arī tās attīstības pakāpi pacienta ķermenī. Atkarībā no tā, cik jutīga ir diagnostikas sistēma, analīzi var veikt vienu vai vairākas reizes - lai apstiprinātu rezultātu, izmantojot jutīgāku reaģentu.

Augstas kvalitātes C hepatīta PCR

Attiecīgo testu var saukt arī par C hepatīta kvalitatīvu PCR testu. Parasti testa jutīguma līmenis, kas nosaka vīrusa klātbūtni, ir no 10 līdz 500 SV.

Ar negatīviem rādītājiem mēs varam teikt, ka vīrusa līmenis pacienta asinīs ir daudz mazāks par testa jutīguma slieksni.

Ja testa rezultāti neko neliecināja, ārstam ir jāapgūst nedaudz vairāk par pacienta jutīguma slieksni..

Tests var noteikt vīrusa klātbūtni pacienta ķermenī apmēram nedēļu pēc inficēšanās.

Kvantitatīvs C hepatīta PCR

Pateicoties šādam pētījumam, jūs varat uzzināt cilvēka ķermenī esošā flavivīrusa RNS daudzumu. Tas nosaka, cik daudz vīrusu RNS ir 1 kubikcentimetrā asiņu. Testa rezultāti tiek atšifrēti SV / ml.

Kvantitatīvā PCR diagnostika jāveic pirms terapeitiskās terapijas izrakstīšanas un, protams, pēc veiktajām procedūrām apmēram 12 ārstēšanas nedēļas. Šī procedūra ir nepieciešama, lai pārliecinātos par terapeitiskās terapijas pareizību. Vīrusu slodze ļauj noteikt 3 galvenos slimības rādītājus:

  • pretvīrusu ārstēšanas ilgums un prognoze (jo lielāka ir vīrusu slodze, jo ilgāks būs terapeitiskais kurss);
  • efektivitāte, kā arī terapijas metode;
  • inficētspēja, tas ir, vīrusa pārnešanas riska pakāpe no inficētas personas uz veselīgu.

Šis diagnozes veids ir atkarīgs no laboratorijas testa veida, kā arī no jutīguma sliekšņa.

Genotropēšana

Tā kā HCV mutācijas ziņā ir augsta aktivitāte, testa laikā ir jānosaka, kurš vīrusa genotips atrodas pacienta asinīs. Ir 11 hepatīta C vīrusa genotipi, tie arī ir sadalīti dažādos apakštipos.

Jāatceras, ka šis analīzes posms ir ārkārtīgi svarīgs, jo, pateicoties tam, ārsts var izdarīt secinājumus par vīrusa fāzi, izrakstīt atbilstošu ārstēšanu un pacientam izrakstīt arī visefektīvākās zāles..

Dažādi HCV genotipi reaģē uz ārstēšanu dažādos veidos. Piemēram, pirmā genotipa izārstēšana prasīs vairāk nekā gadu, un šādas terapijas efektivitāte ir aptuveni 65%. Bet 2. un 3. genotipu var izārstēt sešos mēnešos, savukārt terapijas efektivitāte ir daudz augstāka - apmēram 90%.

Jāatzīmē arī tas, ka, izmantojot genotipēšanu, var saprast arī aknu stāvokli. Piemēram, 3. genotips bieži notiek vienlaikus ar steatozi, kas veicina tauku uzkrāšanos aknu šūnās..

Asins analīze OCP spēj noteikt slimības genotipu. Dažos gadījumos testa sistēmas nevar identificēt vīrusu. Šajā gadījumā jūs varat iegūt rezultātu "nav ierakstīts". Līdzīgs testa rezultāts liecina, ka vīrusa genotips nav raksturīgs noteiktai teritorijai. Šādos gadījumos ir nepieciešams veikt atkārtotus testus, bet jau ar lielāku jutības defektu..

Dekodē C hepatīta PCR analīzi

Visu analīžu dekodēšana ir balstīta uz iepriekš iegūto informāciju. Pateicoties laboratorijas pētījumiem, vairumā gadījumu tiek norādīti šādi dati:

  • testu parasti sauc par reālā laika;
  • norādīts genotipa numurs;
  • frakciju skaits ar RNS;
  • atrasts vai nav atrasts.

Vissvarīgākais šīs analīzes dekodēšanas punkts ir punkts 3. Tas ļauj jums redzēt vīrusu slodzi, no kuras atkarīgs ārstēšanas procedūru ilgums, un turpmāko pacienta stāvokli, kā arī viņa atveseļošanās laiku..

Pētījuma rezultāti parāda genotipa numuru, un dažreiz jūs varat redzēt latīņu burtu, kas ir vīrusa apakšgenotipa noteicējs. Lai ārsts varētu noteikt pareizu diagnozi un izrakstīt ārstēšanu, viņam jāzina slimības genotips, ar to pietiks, lai veiktu turpmākās darbības.

Ja C hepatīta PCR tests ir negatīvs un ELISA ir pozitīvs - ko tas nozīmē?

Lai atšifrētu analīzes, jums jāsazinās ar šādiem speciālistiem - infekcijas slimību speciālistu vai hepatologu. Šie ārsti varēs atšifrēt secinājumus. Būtībā asins analīzes rezultātu atšifrēšana un patiešām jebkura analīze personai bez medicīniskās izglītības ir pilnīgi nesaprotama.

Piemēram, ar negatīvu hepatīta testu un pozitīvu ELISA testu var droši apgalvot, ka pacientam nav NSV, taču tas neizslēdz faktu, ka pacients C hepatītu cieta daudz agrāk un akūtā formā.

Tiek uzskatīts, ka pozitīva ELISA norāda, ka antivielas, kas ražotas pēc tam, kad vīruss ir inficēts agrāk, tiek atrastas asinsritē. Tomēr pašreizējā medicīnā šī analīze netiek uzskatīta par pietiekami ticamu. Ārsti to izmanto tikai kā primāro skrīningu. Diagnozējot slimību, ārsti paļaujas uz PCR testu rādītājiem.

secinājumi

Asinis no vēnas tiek izmantotas PCR testa veikšanai. Parasti tiek veikta divkārša biomateriāla paraugu ņemšana - PCR testam un ELISA. Lai rezultāti būtu precīzi un uzticami, jums jāievēro daži biomateriāla paraugu ņemšanas noteikumi:

  • starp pārtikas patēriņu un biomateriālu savākšanu ir jāuztur laika intervāls - vismaz 8 stundas;
  • asinis jādod tukšā dūšā, no rīta;
  • dienas laikā pirms analīzes jums jāatsakās no intensīvas fiziskās aktivitātes;
  • pirms testa veikšanas jāpārtrauc lietot ceptu pārtiku un lietot alkoholu.

Gatavos rezultātus var apkopot nākamajā dienā.

Kvalitatīva PCR analīze C hepatīta noteikšanai

C hepatīts ir nopietna vīrusu slimība, kas pacienta organismā rodas baktēriju, piemēram, HCV, ietekmē. Atkarībā no attīstības pakāpes šāda patoloģija var noritēt bez simptomiem vai izpausties kā dzelte, samazināta aktivitāte un citi funkcionāli traucējumi. Tajā pašā laikā šo kaiti var izārstēt tikai pirmajās nedēļās, savukārt tās patogēns atrodas inkubācijas periodā. C hepatīta kvalitatīvā analīze var diagnosticēt infekciju sākotnējā stadijā.

Vispārīgi fakti par C hepatītu

C kategorijas hepatīts tiek uzskatīts par visbīstamāko no visiem vīrusu patoloģiju veidiem, jo ​​tam ir ļoti augsta tendence mutēt. Nonākot organismā, RNS komponenti pastāvīgi maina savu struktūru, tāpēc imūnsistēma nevar patstāvīgi ražot pareizās antivielas, lai dabiski izārstētu šo slimību. Tas ļauj infekcijai izplatīties bez lieliem šķēršļiem..

Pēc dažām nedēļām vīruss mutējas līdz tādam stāvoklim, ka cilvēks sāk izjust pirmos simptomus, kas izpaužas kā:

  • Periodisks reibonis;
  • Slikta dūša vai pat vemšana;
  • Hronisks nogurums;
  • Sāpes labajā hipohondrijā;
  • Paaugstināta ķermeņa temperatūra.


Pēc saasināšanās stadijas slimība kļūst hroniska. Ar zāļu terapijas palīdzību pacients var viņu atbalstīt tikai inkubācijas periodā, izvairoties no atkārtotiem recidīviem.

Indikācijas diagnostikai

C hepatīta vīrusa RNS šūnu kvalitatīvs pētījums netiek veikts pēc pacienta pieprasījuma, norādes uz šādu procedūru var būt tikai:

  • Audu audzēšana, izmantojot biopsiju;
  • Leikēmiju un ļaundabīgu audzēju izpēte;
  • Ķermeņa diagnostika ģenētisko patoloģiju klātbūtnei tajā;
  • Personas identificēšana, salīdzinot pacienta bioloģiskos šķidrumus ar pieejamajiem biomateriāliem;
  • Vīrusu infekcijas (ar jauktu hepatītu) izraisītāja noteikšana.

Turklāt RNS analīze spēj parādīt pašreizējā terapijas kursa efektivitātes novērtējumu, kas ir ļoti svarīgi vīrusu slimības ārstēšanā..

Kas ir PCR analīze

Polimerāzes ķēdes reakcijas izpēte ir padziļināta asins analīze, kas tiek veikta, lai tajā atklātu vīrusa RNS šūnas. Atkarībā no virziena šī procedūra var parādīt:

  • Hepatīta klātbūtne vai trūkums organismā (kvalitatīvs PĶR tips);
  • Vīrusu slodze uz imūnsistēmu (kvantitatīvs tests, kas parāda ribonukleīnskābes līmeni asinīs);
  • Pašreizējais slimības genotips (genotipēšana).

No visiem iepriekšminētajiem testiem obligāti jāveic tikai pirmais. Pamatojoties uz tā dekodēšanas rezultātiem, ārsts varēs uzzināt sīkāku informāciju par pašreizējo kaiti..

Pētniecības galvenās priekšrocības

Ja mēs salīdzinām PCR analīzi ar tādām procedūrām kā: UAC, ELISA un ultraskaņas skenēšana, tad pirmajam testam būs vairākas raksturīgas priekšrocības:

  • Liels rezultātu apstrādes ātrums;
  • Spēja izpētīt gandrīz visus cilvēka bioloģiskos šķidrumus (sviedri, asaras, asinis, skrāpējumi no gļotādas un pat ādas epitēlija);
  • Vīrusu slodzes indikatora klātbūtne;
  • Pilnīga testa materiāla dezinfekcija (šo procedūru veic pirms PĶR analīzes sākuma, lai novērstu inficēšanos ar iegūto šķidrumu);
  • Augsts informācijas saturs (šī reakcija parāda ne tikai vīrusa klātbūtni, bet arī nosaka tā raksturu).

Ir svarīgi zināt! Vienīgais C hepatīta PCR testa trūkums ir nepieciešamība pēc sarežģītas personāla un aprīkojuma apmācības..

Augstas kvalitātes PCR C hepatīta gadījumā

Augstas kvalitātes C hepatīta PCR rezultāts ir visa pētījuma pamatrādītājs, jo pateicoties tam ārsts var noteikt pacienta patoloģijas klātbūtni. Bet negatīva atbilde uz iepriekš minēto reakciju ne vienmēr norāda uz pilnīgi veselīgu ķermeni. Galu galā, ja RNS šūnu skaits nokrītas zem pieļaujamā līmeņa, tad PCR skenēšana tos vienkārši nepamana.

Analīzes rezultātu interpretācija

Kvalitatīvs PCR tests RNS klātbūtnei no C hepatīta šūnām var parādīt tikai divas iespējamās atbildes. Apsveriet vērtības, kas norāda cilvēka parasto stāvokli un notiekošo patoloģiju.

Norm

Kvalitatīvās polimerāzes ķēdes reakcijas testa normālais rādītājs ir negatīvs testa rezultāts. To novēro pie nulles vīrusu slodzes un identificēta genotipa neesamības. Bet, lai pilnībā pārliecinātos par viņu drošību, pacientam labāk ir veikt vairākas papildu procedūras, kas var atklāt slimības, kas izraisa C hepatīta infekciju..

Novirzes

Ja PCR tests uzrādīja pozitīvu atbildi, tad tā ir skaidra pazīme, ka pārbaudāmās personas ķermenī ir vīruss. Atkarībā no kvantitatīvās vērtības (no 1,8x līdz 2,4x) ārsts varēs noteikt pašreizējo tā attīstības pakāpi, kas būs pirmais solis pareizas terapijas kursa sastādīšanā. Ar genotipēšanas palīdzību jūs varat noteikt hepatīta kategoriju arī pirms tam raksturīgajām izpausmēm (B1, B2 vai B3 rādītāji)..

Nepatiesi pozitīvi un kļūdaini negatīvi rezultāti

Pats par sevi PCR tests gandrīz nekad nav kļūdains. Bet cilvēciskā faktora ietekmē kļūdainas diagnozes iespējamība ievērojami palielinās. Tādēļ, lai iegūtu vispareizāko dekodēšanu, pirms polimerāzes ķēdes reakcijas veikšanas jāņem vērā šādi noteikumi:

  1. Visiem pētītajiem biomateriāliem jābūt pienācīgā attālumā viens no otra (visu biokomponentu kombinācija vienmēr radīs kļūdaini pozitīvu rezultātu);
  2. Iegūtie šķidrumi analīzei jāuzglabā un jāpārvadā īpašos aizsargātos traukos, kur tiek ievērots temperatūras režīms (bioloģiskās sastāvdaļas ļoti viegli zaudē savas īpašības, kas arī kļūst par kļūdainas diagnozes cēloni);
  3. Pirms darba ar biomateriāliem laboratorijas telpa ir labi jāapstrādā, lai gruveši neiekļūtu testa šķidrumā;
  4. Reaģentu, kuru derīguma termiņš ir beidzies, lietošana ir stingri aizliegta (šāda nolaidība mūsdienu medicīnas iestādēs nav reta parādība).

Ir svarīgi zināt! Iegūtā PCR rezultāta pareizība var būt atkarīga arī no paša pacienta, ja viņš neievēro noteikumus par sagatavošanos asins paraugu ņemšanai. Katras no uzskaitītajām situācijām rezultāts būs analīzes atkārtota sniegšana.

PĶR analīzes biežums

Mūsdienu medicīna nenosaka ierobežojumus augstas kvalitātes C hepatīta PCR analīzei. Bet šāda procedūra tiek veikta katrai pacientu kategorijai noteiktu skaitu reižu. Proti:

  • Cilvēkiem, kuru ķermenī nav patoloģijas - ne vairāk kā 1-2 reizes gadā;
  • Pacientiem, kuri tiek ārstēti no C hepatīta - 2 reizes (pirms terapijas uzsākšanas un tuvāk tā vidum);
  • Grūtniecēm - vismaz 1-2 reizes mēnesī, grūtniecības laikā (tālāk tests tiek veikts ne biežāk kā 2 reizes gadā);
  • Dažu nedēļu veciem zīdaiņiem - vismaz 2 reizes gadā.

Nekaitīguma dēļ PCR metodi bieži lieto pat jaundzimušajiem, kas tiek uzskatīta par vēl vienu no tās būtiskajām priekšrocībām..

Izmaksu ziņā polimerāzes ķēdes reakcijas veikšanas procedūra ievērojami atšķiras no standarta pētījumiem. Tāpēc daži cilvēki to nevar atļauties. Bet saskaņā ar citiem kritērijiem šim testam nav konkurentu, tāpēc ārsti to iesaka visbiežāk..

Hepatīta PCR diagnostika: kā atšifrēt, tabula

Hepatīta PCR analīze - kas tas ir un kāpēc tas tiek darīts

PCR analīzes būtība ir tāda, ka pētāmā gēna daļa ir spiesta pavairot mēģenē, izmantojot īpašus enzīmus un apstākļus. Hepatīta vīrusu PCR analīze ļauj noteikt vīrusa celmu, bez kura nav iespējams veikt efektīvu ārstēšanu: katrs genotips ir atšķirīgi jutīgs pret pretvīrusu zālēm.

Tiek izmantoti divu veidu PCR:

  • kvalitatīvs;
  • kvantitatīvs.

Pretvīrusu terapija ir pastāvīgi jāuzrauga, lai savlaicīgi pielāgotu ārstēšanu; šiem nolūkiem tiek izmantota arī polimerāzes ķēdes reakcija.

Kvalitatīva un kvantitatīva PCR

Kvalitatīva hepatīta hepatīta PĶR dod atbildi: vai pacienta asinīs ir vīrusa celms un kurš no tiem. Genotipēšana ir nepieciešama, lai precizētu diagnozi, slimības prognozi un noteiktu ārstēšanas laiku.

Kad vīrusa klātbūtne ir apstiprināta, tiek veikta hepatīta kvantitatīva PCR, ar kuras palīdzību tiek aprēķināts RNS molekulu skaits pacienta laboratorijas paraugā.

Sagatavošanās hepatīta PCR analīzei

Analizēšanai ar polimerāzes reakcijas metodi nepieciešamas venozās asinis. Tas jādara no rīta tukšā dūšā..

Pacientam pienācīgi jāsagatavojas pētījumam:

  • Lai 10 stundas atteiktos no ēdiena, jūs varat dzert tikai tīru ūdeni.
  • Pārtrauciet alkohola lietošanu iepriekšējā dienā, nesmēķējiet 4 stundas.
  • Pirms pārbaudes jāizvairās no fiziska un emocionāla stresa..
  • 2 dienas pārtraukt narkotiku lietošanu, ja tas nav iespējams, tad jābrīdina laboratorijas palīgs. Dažas zāles ietekmē galīgo rezultātu.

C hepatīta PCR analīze

Ja C hepatīta PCR tests dod pozitīvu rezultātu, tas norāda, ka patogēns mikroorganisms pastāvīgi dala un inficē aknu šūnas.

Turpmāko C hepatīta kvantitatīvo PCR mēra starptautiskajās vienībās uz 1 ml vai SV / ml, kas nozīmē, cik daudz noteikta C vīrusa celma ribonukleīnskābes eksemplāru atrod 1 ml testa asinīs..

Zemāk esošajā tabulā parādīts C hepatīta kvantitatīvā pētījuma dekodēšana ar PCR metodi:

Pētījuma veidsIespējamais rezultāts un paredzētais atšifrējums
Augstas kvalitātes PCR
Kvantitatīvs
Genotipēšana
Vīrusu slodze, kopijas / mlSlodzes novērtēšanaPatogēna replikācijas raksturs
103 un mazākĻoti zemsNeaktīvs
104. – 105ZemsBiežāk neaktīvi
106. lppMērensAktīvs
107LielsĻoti aktīvs
  1. Zema vīrusu slodze ir signāls, ka terapeitiskā ārstēšana tiek izvēlēta pareizi, un C hepatīta ārstēšanas prognoze ir labvēlīga..
  2. Augsta vīrusu šūnu koncentrācija norāda, ka slimība ir akūtā fāzē. Pacienta asinis ir bīstams infekcijas avots.
  3. Vīrusu slodze, kuras rādītāji ir vidējā līmenī, raksturo vai nu HVS hronisko stadiju, vai arī tai var būt divas attīstības tendences: tās palielināšanās vai samazināšanās virzienā.

C hepatīta kvantitatīvā PCR analīze tiek veikta visā pretvīrusu terapijas laikā: pēc 4, 12 un 24 nedēļām, kuras mērķis ir samazināt vīrusu slodzi.

Tās beigās - pēc 6 mēnešiem tiek veikta kontroles PCR.

B hepatīta PCR analīze

Lai noteiktu infekciju (HBV DNS), tiek veikta B (B) hepatīta PCR analīze.

HBV DNS koncentrāciju mēra kopijās / ml vai me / ml. Novērtējot pētījuma rezultātus, tie vadās pēc šādiem rādītājiem:

  • 2x10 ^ 6 - deviņdesmit piecos procentos gadījumu tas kļūst hronisks.

Dekodējot hepatīta PCR analīzi

Kvalitatīvajai PCR analīzei ir divas atbildes:

  1. negatīvs;
  2. pozitīvs.

PCR negatīvs nozīmē, ka asins paraugos netika atrasts patogēns.

Rezultāta ticamības varbūtība ir 95%. Atlikušie 5% ir cilvēku kļūda. Šī iespēja ir atļauta augsto pētījumu prasību dēļ:

  • reaģentu uzglabāšanas noteikumi;
  • atbilstoša medicīniskā personāla kvalifikācija;
  • biomateriāla tīrība.

Pašam PCR komplektam ir 100% diagnostikas precizitāte.

Kvantitatīvā PCR hepatīta gadījumā ļauj noteikt vīrusa slodzi uz pacienta ķermeņa. Ar viņa palīdzību:

  • slimības stadija ir noteikta (akūta, hroniska);
  • tiek noteikta pretvīrusu ārstēšanas efektivitāte;
  • tiek noteikta aknu biopsijas nepieciešamība.

Dažos gadījumos pacients nejūt nekādas slimības pazīmes, savukārt PCR metode ir noteikusi infekciju. Tas nozīmē, ka slimība ir agrīnā attīstības stadijā vai hroniskā formā. Lai precizētu diagnozi, ir nepieciešami papildu pētījumi, lai savlaicīgi sāktu pretvīrusu terapiju.

PCR diagnostikas izmaksas

Valdības klīnikas bez maksas veic asins analīzes PĶR gadījumā, ja ir nosūtīts infekcijas slimību speciālists vai hepatologs.

Maksas pakalpojumi PCR diagnostikai tiek nodrošināti visās lielākajās Krievijas pilsētās. Izmaksas ir atkarīgas no testa veida, pieejamā aprīkojuma, laika un citiem faktoriem.

  • Augstas kvalitātes PCR analīze Maskavā un Sanktpēterburgā maksās no 600 līdz 900 rubļiem. Reģionos - no 300 līdz 800 rubļiem.
  • C hepatīta vīrusu slodzes noteikšana maksās 17 000-22 000 rubļu. B (B) hepatīta gadījumā kvantitatīvā pētījuma cena: 1200-10000 rubļi.

PCR metodes priekšrocības un trūkumi

Kādas ir polimerāzes ķēdes reakcijas metodes priekšrocības salīdzinājumā ar citām diagnostikas metodēm?

  1. Plašs pielietojuma klāsts. Izmantojot PCR, izmantojot standarta aprīkojumu, jūs varat identificēt jebkuru vīrusu.
  2. Patogēna noteikšanas precizitāte. Izmantojot dažādas fermentu kombinācijas un testa metodes, tiek sasniegta 100% norādītās infekcijas testa specifikācija.
  3. Augsta jutība. Šī metode ļauj noteikt vienas vīrusa molekulas klātbūtni asinīs.
  4. Efektivitāte. Kvalitatīvā analīze ir gatava dažās stundās, kvantitatīvā - divās dienās.
  5. Vīrusa diagnostika inkubācijas periodā. Izmantojot PCR, patogēnu nosaka nevis antivielu klātbūtne, kad jau ir ķermeņa imūnā atbilde, bet pirms patoloģiskā procesa sākuma, kas atvieglo ārstēšanu.

PCR analīzes trūkumi ir tā priekšrocību sekas:

  • analīzes tīrībai ir nepieciešama visaugstākā tīrības pakāpe, ieskaitot gaisu laboratorijā, lai "sveša" DNS neiekļūtu pētāmajā paraugā;
  • augstas prasības personālam, kas veic biomateriālu paraugu ņemšanu un analīzi.

Iegūto rezultātu novērtējums jāveic ārstējošajam ārstam, kurš zina, kā atdalīt patieso analīzi no viltus pozitīvā (kad ārstēšana jau ir pabeigta, bet asinīs paliek dzīvotnespējīgs vīruss) un viltus negatīva (ja vīruss klīniskajā attēlā netiek atklāts).

PCR C hepatīta gadījumā

PCR (vai polimerāzes ķēdes reakcija) ir laboratorijas metode, kuru Cary Mullis (ASV) ieviesa patogēna DNS un RNS diagnosticēšanai. Ļoti jutīgai PCR analīzei, lai identificētu izraisītāju vīrusu, pietiek tikai ar vienu ādu vai ķermeņa šķidrumā atklātu molekulu.

PCR veidi

Hroniska C hepatīta asins analīzes var būt trīs veidu - kvalitatīvās, kvantitatīvās un analīzes, kas nosaka vīrusa genotipu.

Kvalitatīva C hepatīta CR analīze tiek veikta pacientiem, kuriem ELISA analīze atklāja antivielas pret CVHC. Kvalitatīvās PĶR analīzes rezultātu norāda vārdi “RNS konstatēts” vai “RNS nav noteikts”. Pārbaudes sistēmas ar jutību vismaz 50 SV / ml spēj noteikt asinīs minimālo patogēna daudzumu. Pie zemākas vīrusa koncentrācijas analīze var dot kļūdaini negatīvu rezultātu. Lai izvairītos no kļūdām, laboratorijām, kas specializējas PCR diagnostikā, jābūt aprīkotām ar augstas jutības testa sistēmām. Piemēram, Invitro laboratorijā tiek izmantotas testa sistēmas ar jutību 15 SV / ml. Pacientiem un ārstiem ir tiesības pieprasīt laboratorijas darbiniekiem sniegt informāciju par testa jutīgumu.

Kvantitatīva C hepatīta C analīze ir nepieciešama, lai noteiktu vīrusa koncentrāciju asinīs (vai virēmijas pakāpi). Pētījuma rezultāti ir norādīti ar cipariem. Ja 1 ml asiņu atrod 2 miljonus SV, rezultāts ir šāds - 2 × 10 * 6 SV / ml. Dažās laboratorijās tiek izmantots cits rādītājs - kopiju skaits uz 1 ml asiņu (1 SV ir 4 RNS kopijas). Izrādās, ka 2 × 10 * 6 SV / ml ir vienāds ar 8 × 10 * 6 vīrusa RNS eksemplāriem (8 miljoni eksemplāru) 1 ml asiņu.

Genotipizēšanas laikā tiek noteikts, kuram no sešiem genotipiem vīruss pieder. Tas ir patogēna genotips, kas ietekmē klīnisko ainu, komplikāciju rašanās ātrumu un turpmāko pacienta prognozi. Pareiza vīrusa genotipa noteikšana ļauj izvēlēties zāļu kombināciju un noteikt ārstēšanas kursa ilgumu.

Indikācijas analīzei

Lai apstiprinātu HCV klātbūtni, tiek noteikts PCR tests, kas palīdz atklāt patogēnu un sākt ārstēšanu. Norādes par iecelšanu amatā:

  • Pacientam ir aknu iekaisuma pazīmes.
  • Tiek veikti profilaktiskie skrīninga testi.
  • Ir jāpārbauda cilvēki, kas saskaras ar pacientiem ar hepatītu.
  • Tiek diagnosticēts jauktas izcelsmes hepatīts, un ir nepieciešams noteikt galveno patogēnu.
  • Tiek noteikts patogēna reprodukcijas aktivitātes līmenis hroniskiem pacientiem.
  • Pacientam tiek diagnosticēta ciroze.
  • Ir nepieciešams novērtēt terapijas efektivitāti.

Sagatavošanās hepatīta PCR diagnostikai

Procedūra tiek veikta no rīta tukšā dūšā, asinis tiek ņemtas no vēnas.

Pacientam jāievēro šie noteikumi:

  • Neēdiet 10 stundas pirms procedūras. Ir atļauts dzert tikai tīru ūdeni.
  • Nesmēķējiet 4 stundas pirms manipulācijas un dienu pirms analīzes nelietojiet alkoholu.
  • Pirms procedūras izvairieties no fiziska un psiholoģiska stresa.
  • Nelietojiet zāles 2 dienas pirms asiņu ņemšanas. Ja pacients kāda iemesla dēļ lietoja medikamentus, par to jāpaziņo laboratorijas palīgam (noteiktu zāļu lietošana rada kļūdaini pozitīvu rezultātu).

PCR pētījuma rezultātu dekodēšana

ELISA un PCR analīzes atšifrēšana ir hepatologa vai infekcijas slimību speciālista uzdevums. Nepieciešama arī biopsija, bioķīmiskais asins tests un ultraskaņas rezultāti. Atšifrēt PCR analīzes rezultātus var tikai kvalificēts ārsts, kuram, pamatojoties uz tiem, jānosaka terapija. C hepatīta vīrusu slodzes dekodēšanas tabulas ir norādītas zemāk..

Kvalitatīvā analīze. Atkodēšana

AtklātsPacients ir inficēts, jo vīrusa RNS tika atrasta viņa bioloģiskajā materiālā.
Nav atrastsPacients nav inficēts vai vīrusa RNS daudzums ir zem jutības robežas.

Kvantitatīvā analīze. Atkodēšana

Nav atrastsCilvēks ir vesels. Vīrusu RNS biomateriālā netika atrasta, vai arī tā koncentrācija ir zemāka par jutīguma robežu.
Līdz 1,8 * 10 ^ 2 SV / mlVīrusu RNS koncentrācija ir zem testa diapazona. Šādā gadījumā jābūt uzmanīgam, interpretējot rezultātu. Bieži nepieciešama atkārtota pārbaude.
Līdz 8 * 10 ^ 5 SV / mlZema vīrusu slodze C hepatīta gadījumā. Parasti vīrusa koncentrācijas samazināšanās norāda uz veiksmīgu ārstēšanu.
Vairāk nekā 8 * 10 ^ 5 SV / mlAugsta vīrusu slodze ar C hepatītu.
Vairāk nekā 2,4 * 10 ^ 7 SV / mlTā kā vīrusa RNS ir ārpus kvantitatīvās noteikšanas diapazona augstākā līmeņa, vīrusu slodzi nevar noteikt. Nepieciešams atkārtots atšķaidīšanas tests.

Noteikta noteikta genotipa RNSPacienta biomateriālā tika atrasts hepatīta C vīruss, kas pieder noteiktam genotipam un apakštipam. Rezultāts tiek norādīts ar cipariem un latīņu burtiem: 1a, 2b utt. Ir 7 genotipi un 67 apakštipi. Krievijā no 7 genotipiem tiek atrasti pirmie 3.
Atklāta C hepatīta vīrusa RNSPacienta biomateriālā tika atrasta Krievijai netipiska vīrusa genotipa RNS, tāpēc nepieciešami papildu pētījumi.
Nav atrastsCilvēks ir vesels, vai arī viņa asinīs ir ļoti zema RNS vīrusa koncentrācija.

Dažreiz PCR tests ir negatīvs, bet ELISA tests norāda uz antivielu klātbūtni pret vīrusu. Tas nozīmē, ka persona, kurai ir bijis akūts C hepatīts, varēja pats atveseļoties. Apmēram 20 infekcijas gadījumi ar spēcīgu ķermeņa izturību pret infekciju beidzas ar spontānu dziedināšanu.

Dažās situācijās augstas precizitātes PCR analīzes rezultātus var sagrozīt:

  1. Temperatūras režīma un citu asins transportēšanas apstākļu pārkāpumi laboratorijā.
  2. Asins paraugu piesārņojums.
  3. Heparīna un citu antikoagulantu pēdu klātbūtne asinīs.
  4. Inhibitoru klātbūtne biomateriālā (polimerāzes ķēdes reakcija palēninās vai apstājas).

PCR analīzes priekšrocības

Pirmkārt, tā ir agrīna diagnostikas metode, kas ļauj identificēt vīrusa ģenētisko materiālu. ELISA analīze spēj noteikt tikai vielas, ko organisms ražo, reaģējot uz infekciju (imūnglobulīni). No inficēšanās ar C hepatītu līdz imūnās atbildes reakcijas sākšanai var paiet vairākas nedēļas vai pat mēneši, un šajā periodā ELISA analīze ir neefektīva. PĶR analīze sniedz atbildi jau pirmajā infekcijas nedēļā.

Otra PCR analīzes priekšrocība ir maza kļūdu iespējamība. Pētījuma laikā tiek noteikta tikai viena veida patogēniem raksturīga ģenētiskā materiāla sadaļa, kas ļauj izslēgt nepatiesu rezultātu. ELISA analīze parāda antivielu klātbūtni, kas tiek izdalītas pret dažādiem vīrusiem (krusteniskās antivielas).

PCR trūkumi

Tikpat efektīvi kā pētījumi, tam ir arī trūkumi:

  • PCR pētījuma laikā patogēnu (arī nedzīvo) ģenētiskais materiāls tiek atkārtots, un tas noved pie rezultātu sagrozīšanas. Lai novērtētu ārstēšanas efektivitāti, izmantojot PCR analīzi, vismaz 2 mēnešus pēc iepriekšējā tiek veikts otrais pētījums. Pacienta ķermenis ir "jāattīra" no mirušiem vīrusiem.
  • Pārbaudes sistēmas nosaka to vīrusa genoma daļu, kas teorētiski var piederēt citiem vīrusiem vai mikroorganismiem, tāpēc ir iespējams kļūdaini pozitīvs rezultāts.
  • Ātra vīrusu mutācija dažkārt pārsniedz testa sistēmu spēju noteikt patogēna genomu, tāpēc ir iespējama kļūdaini negatīva atbilde.

Ražotāji regulāri testē laboratorijas testu komplektus, lai noteiktu, kā testa sistēmas reaģē uz savstarpējām reakcijām vai noteiktu vīrusa genotipu.

C hepatīta PCR analīzes cena

Valsts iestādēs jūs varat pārbaudīties bez maksas, nepieciešams tikai hepatologa vai infekcijas slimību speciālista nosūtījums.

Apmaksātie pētījumi ir pieejami visās lielākajās Krievijas Federācijas pilsētās. Cenu ietekmē pētījuma veids, izmantotais aprīkojums, analīzei nepieciešamais laiks.

Maskavā un Sanktpēterburgā augstas kvalitātes C hepatīta CR tests maksā no 600 līdz 900 rubļiem, reģionā - no 300 līdz 800 rubļiem.

C hepatīta kvantitatīvā PCR analīze maksā no 17 000 līdz 22 000 rubļu, B hepatīta gadījumā - no 1200 līdz 10 000 rubļu.

Lai iegūtu ticamus C hepatīta PCR analīzes rezultātus, jums jāsazinās tikai ar cienījamām laboratorijām. Šajā gadījumā jautājums par pētījumu izmaksām izplēn otrajā plānā..